利用血细胞计数器进行细胞计数是一项重要的技术,无论是在体外实验还是在临床研究中。该方法的应用可以显著提高研究的精确性与可重复性,同时确保结果的可靠性。无论您的研究领域是微生物学、血液学、肿瘤学或其他疾病相关的细胞培养,准确的细胞计数都是至关重要的。
步骤概述
本文将介绍如何利用血细胞计数器进行细胞计数,从样品准备到使用台盼蓝染色测定细胞活力,确保您能有效利用该工具进行实验。
第一阶段:准备血细胞计数器
1. 如果使用玻璃血细胞计数器及盖玻片,请在使用前用酒精进行清洗,并用水润湿盖玻片后固定在血细胞计数器上。
2. 如果使用一次性血细胞计数器,直接从包装中取出备用即可。
第二阶段:制备细胞悬浮液
请参考表1,了解胰蛋白酶消化贴壁细胞所需的DPBS和胰蛋白酶-EDTA的具体用量。
第三阶段:细胞计数
步骤如下:
1. 轻轻旋转培养瓶,确保细胞分布均匀。
2. 在细胞沉淀之前,用无菌移液器取出0.5mL细胞悬浮液,放入EP微量离心管中。
3. 取100μL细胞加入新的EP离心管中,并加入400μL 0.4%台盼蓝,轻轻搅拌。
第四阶段:细胞活力计算
1. 通过每组16个方块中的平均活细胞数,乘以10,000(10^4),再乘以稀释比例,计算出原始细胞悬液中的活细胞数/mL。
2. 如果记录了每组16个角方块的活细胞与死细胞数量,可以进一步计算细胞活力。将活细胞数和死细胞数相加得到总细胞数,然后用活细胞数除以总细胞数即可。
计算公式为:活细胞数 / (活细胞数 + 死细胞数)。通过以上步骤,您可以确保实验结果的准确性,您可以依赖金年会金字招牌诚信至上提供的技术和服务,推进您的生物医疗研究。
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