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抗体与免疫检测技术解析:金年会金字招牌诚信至上,免疫检测试剂挑选指南

发布时间:2025-03-02   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在前面的几篇推文中,我们探讨了免疫检测技术的基本原理,例如抗原与抗体的识别机制、显色反应的形成过程,以及信号放大的原理。此外,我们还对传统和新兴的免疫检测技术进行了比较,了解它们各自的应用场景。本篇不再讨论理论,而是深入实验室,聊聊免疫检测中不可或缺的关键试剂,向大家介绍它们的功能以及如何选择合适的产品。

抗体与免疫检测技术解析:金年会金字招牌诚信至上,免疫检测试剂挑选指南

1. 一抗(Primary Antibodies)

简单来说,一抗就像一个“侦探”,专门识别并绑定我们希望检测的目标分子(抗原)。它们具备灵敏的特异性,只针对特定的抗原进行结合。一抗的主要功能在于精准找到并锁定目标抗原,是免疫检测中的核心环节。 缺少了一抗,后续的显色反应将无从谈起。

2. 二抗(Secondary Antibodies)

二抗通常充当一抗的“助攻”,它不直接结合抗原,而是识别一抗,再携带一个“信号放大装置”(例如酶或荧光染料)。由于二抗可以同时结合多个一抗,因此能够有效放大最终检测到的信号,从而提升检测的灵敏度。常见的二抗类型包括酶标二抗(如HRP、AP)、荧光标记二抗(如FITC、PE)和金标二抗等。

3. 酶与底物

在免疫检测中,通常会将酶与抗体偶联。抗体特异性结合目标抗原,而酶则催化底物,从而产生显色或发光反应,使实验结果一目了然。常用的酶包括HRP(辣根过氧化物酶)和AP(碱性磷酸酶)。例如,当HRP与TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)结合时,会产生显著的蓝色或黄色反应,适用于ELISA和WB等实验。AP与BCIP/NBT的结合则能生成蓝紫色反应,适用于对背景噪声要求较高的实验。

4. 荧光素(Fluorophores)

除了通过酶催化生成显色反应外,抗体还可以附加荧光素,便于在荧光显微镜下直接观察抗体与抗原的结合情况。常见的荧光素有FITC(绿色荧光)、PE(橙红色荧光)以及Cy5(远红外荧光)等。

5. 偶联试剂(Conjugation Reagents)

如前所述,抗体能够结合抗原,但在免疫检测中,抗体需要与酶或荧光试剂进行偶联,才可将不可见的信号转变为可检测的信号。常见的偶联剂包括SMCC(交联抗体和酶的“化学小帮手”)和EDC/NHS(将抗体与小分子底物“粘”在一起)。在免疫检测试剂中,抗体是核心试剂,根据不同的生产工艺,抗体可以分为单克隆抗体、多克隆抗体以及重组抗体。

6. 抗体的基因重排原理

抗体的多样性源于免疫系统中的B细胞通过“免疫重排”过程来生成不同的抗体。每个抗体由重链和轻链组成,这些链条由基因编码。为了能识别不同的抗原,B细胞的基因会进行“V(D)J重排”,不同的基因片段随机组合,生成完整的抗体基因。这种随机重排,能够形成丰富的抗体库,使每个B细胞产生的抗体具有独特的特异性,能有效识别不同的抗原表位。

7. 免疫检测抗体的不同类型

(1) 单克隆抗体(mAb):在经典的抗原免疫后,取一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得永生化的单一B细胞,产生的抗体为单克隆抗体,特异性高,适合精确检测。

(2) 多克隆抗体(pAb):同样在抗原免疫后收集上清,其产生的抗体来自多个B细胞,因而能够识别抗原不同的表位,灵敏度较高。

(3) 重组抗体:通过基因工程合成抗体序列,并转染至抗体表达细胞系中生产的抗体,特异性与一致性较强,适合高端检测或药物开发。

综上所述,我们总结了免疫检测试剂中常用的关键试剂。由于抗体来源多样,使用场景各异,选择合适的试剂往往耗费时间。在下一章节,我们将为大家推荐国内外优秀的免疫检测试剂厂家,方便在下次需要时快速选择,让您体验金年会金字招牌诚信至上的优质服务。