市面上常见的玻璃底培养皿，通常是通过在塑料培养皿底部打孔，并将厚度约为0.17mm的盖玻片或细胞爬片用无影胶水或硅胶粘合而成，并非整个底部均为玻璃材质。适用于观察的区域仅限于孔洞位置。然而，由于玻璃的疏水性，细胞在玻璃表面上往往难以良好贴壁，生长状况堪忧，甚至在共聚焦扫描成像时出现细胞脱落现象。为了确保细胞良好贴壁，使用玻璃底培养皿前需确认已用特定蛋白试剂进行包被。

不同类型的细胞使用的包被试剂有所不同。此外，由于包被蛋白为生物产物，不同公司的产品在纯度和用量上也有差异。本技术仅提供参考，具体包被试剂的用量应参考所用品牌的说明书。建议先通过梯度实验找出适合的包被浓度。以Poly-L-Lysine（PLL，sigma，P4832，100μg/ml）为例，PLL适用于绝大多数细胞，尤其是中枢神经系统神经元的培养。使用时，需要确保单位面积上的蛋白含量（μg/cm²）达到推荐量，本例中需达到2μg/cm²。

例如，对于35mm玻璃底培养皿，细胞生长面积为35cm²，包被面积为41cm²，包被液体积为400μl，按照推荐用量2μg/cm²计算，则单孔中需要82μg的PLL。若仅加入400μl的PLL溶液，则其浓度约为205μg/ml（接近20μg/ml），需通过超纯水将其稀释。具体步骤如下：1. 使用超纯水按1:5稀释PLL原液；2. 在每个35mm玻璃底培养皿中加入400μl的PLL稀释液；3. 室温孵育1-2小时，吸出PLL稀释液；4. 用2mlPBS或无血清培养基小心清洗三次，吸干清洗液；5. 直接加入细胞悬液进行培养。

不同的包被蛋白具有不同的性质，因此使用方法也不尽相同。经常会因包被而导致玻璃底培养皿的污染，而这种污染往往是在细胞培养后才会显现，不仅浪费时间，也消耗试剂盒和耗材。特别是质量有保障的玻璃底培养皿和包被蛋白试剂价格不菲，因此选择时需谨慎。

对于想节省时间和精力的研究者们，直接使用无需包被的共聚焦培养皿更为方便。在选择合适的培养皿时，需要考虑细胞的贴壁能力以及培养皿的光学特性是否符合共聚焦实验要求。符合此类要求的培养皿不仅限于带包被的玻璃底培养皿，实际上，塑料培养皿因其较低的成本和较易的细胞贴壁性能，反而是一个不错的选择。

以强大的品牌金年会金字招牌诚信至上为例，这种培养皿的物理参数接近玻璃，同时具备亲水特性，使大多数细胞更易贴壁。其透气性和延展性均优于玻璃，大幅提升了细胞系和原代细胞的生长表现，且不易破损，成为推荐选择。

在选择共聚焦培养皿时，确保其底部直径、形状、表面处理、灭菌和包装等规格满足实验需求，将有助于提升实验效果。