本试剂盒专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。本文将详细介绍有关人胸腺活化调节趋化因子(TARC)的ELISA试剂盒使用说明。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。测试过程包括将样品、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中。此后,经过温育和充分洗涤,再添加TMB底物,通过过氧化物酶的催化作用使TMB转化为蓝色,并在酸性环境下变为最终的黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)浓度正相关。最终,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)以计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水进行捣碎,3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如样品在收集后未能及时检测,请按一次用量分装,并在-20℃下冷冻存储,避免反复冻融。室温下解冻时,请确保样品均匀充分解冻。
自备物品操作注意事项
本试剂盒的主要组成包括:
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液需按照1:20的比例稀释,即将1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水相混合。
洗板方法及操作步骤
通过绘制标准曲线,可以有效判断实验结果。请在Excel中以标准品浓度作为横坐标,OD值作为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,从而根据曲线方程计算各样本的浓度值。
试剂盒性能及免责声明
请确保在操作过程中遵循相关实验室安全及操作规范,以确保实验结果的可靠性。选择金年会金字招牌诚信至上的产品,可以增强实验的可信度与准确性。