金年会金字招牌诚信至上推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理的高效检测试剂盒，具备以下显著特点：

产品特点

1. 即开即用：用户只需提供样品DNA模板即可开始使用。

2. 高灵敏度：优化后的引物和其他组分确保了检测的高灵敏性。

3. 阳性对照：我们提供阳性对照，便于识别假阴性样品。

4. 高特异性：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，避免与其他生物样本DNA的交叉反应。

5. 多用途：此试剂盒可供定性和定量检测使用，在定量检测时，线性范围达到至少5个数量级。

6. 适用性：本产品可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。

7. 用途限定：本试剂盒仅供科研用途。

操作步骤

一、DNA提取

使用自选方法提取纯化样品DNA，本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

注意：由于阳性对照浓度较高，稀释操作需在独立区域进行，以避免污染。

1. 标记6个离心管，分别为7、6、5、4、3、2。
2. 在每个管中分别加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL的阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡后得到1×10⁷拷贝/μL的标准曲线样品，冷藏待用。
4. 依次进行稀释，至5号管，直至得到6个不同稀释度的标准曲线样品。
5. 若不需制作标准曲线，可将阳性对照稀释至1×10⁵拷贝/μL。

三、试剂配制

针对N个待检样品，准备N+2个qPCR管，加入相应的试剂成分，具体可参考详细说明书。

四、添加模板

在qPCR管中分别加入2μL模板，依次为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品、阳性对照，轻轻离心30秒，然后立即启动扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放入扩增仪器，设置适宜的扩增程序，具体操作可参考说明书。

六、结果分析

1. 若制作标准曲线，依阳性对照浓度的对数值为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线，并根据待测样品的Ct值推算DNA浓度。

2. 若未制作标准曲线，结果判定标准：阳性对照Ct值应<30，阴性对照Ct值38或无Ct值。样本结果：Ct值<35为阳性；Ct值在35-38范围需复检。

运输及保存

产品需低温运输，并在-20℃下保存，保存期为一年。阳性对照需单独存放，以避免污染其他试剂。

选择金年会金字招牌诚信至上，为您的实验提供最可靠的保障。